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孟鲁斯特对人支气管上皮细胞黏液蛋白分泌的影响
- 叶剑敏,鲍一笑,李玲
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2015, 33(8):
738.
doi:10.3969 j.issn.1000-3606.2015.08.014
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摘要
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多维度评价
目的 探讨孟鲁斯特对脂多糖(LPS)诱导的人支气管上皮细胞黏液蛋白分泌的影响。方法 体外分离鉴定人原代支气管上皮细胞,LPS以1 μg/ml剂量诱导细胞炎症反应,孟鲁斯特(50、20、10 μmol/L)进行干预治疗,酶联免疫法(ELISA)检测分泌细胞上清黏蛋白5AC(MUC5AC)水平变化,并采用定量逆转录PCR(RT-PCR)、免疫印迹(Western-blot)检测MUC5AC mRNA和蛋白表达情况;2’,7’-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)荧光探针检测活性氧(ROS)变化;Western-blot检测孟鲁斯特干预治疗前后磷酸化细胞核转录因子κB(p-NF-κB)、磷酸化NF-κB抑制蛋白(p-IκBα)、磷酸化细胞外调节激酶1,2(ERK1/2)活化情况。结果 孟鲁斯特以剂量依赖性降低LPS诱导的人支气管上皮细胞内MUC5AC mRNA水平和蛋白水平,抑制ROS产生,抑制NF-κB/p-IκBα、ERK活化。结论 孟鲁斯特在体外能抑制MUC5AC的产生,其机制可能与抑制NF-κB、EKR的激活有关。